淺談激光共聚焦顯微鏡的特點
更新時間:2023-05-17 點擊次數(shù):906
激光掃描共聚焦顯微技術已用于細胞形態(tài)定位、立體結構重組、動態(tài)變化過程等研究,并提供定量熒光測定、定量圖像分析等實用研究手段,結合其他相關生物技術,在形態(tài)學、生理學、免疫學、遺傳學等分子細胞生物學領域 得到廣泛應用。
激光共聚焦顯微鏡:在熒光顯微鏡成象的基礎上加裝激光掃描裝置,使用紫外光或可見光激發(fā)熒光探針。利用計算機進行圖象處理,從而得到細胞或組織內(nèi)部微細結構的熒光圖象,以及在亞細胞水平上觀察諸如Ca2+、pH值、膜電位等生理信號及細胞形態(tài)的變化。
激光共聚焦顯微鏡利用激光束經(jīng)照明針孔形成點光源對標本內(nèi)焦平面的每一點掃描,標本上的被照射點,在探測針孔處成像,由探測針孔后的光點倍增管(PMT)或冷電耦器件(cCCD)逐點或逐線接收,迅速在計算機監(jiān)視器屏幕上形成熒光圖像。
照明針孔與探測針孔相對于物鏡焦平面是共軛的,焦平面上的點同時聚焦于照明針孔和發(fā)射針孔,焦平面以外的點不會在探測針孔處成像,這樣得到的共聚焦圖像是標本的光學橫斷面,克服了普通顯微鏡圖像模糊的缺點。